大家好，想分享一些所學，請不吝指教^^
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本文為實習期間所學分享，以十字花科蔬菜抗黑腐病育種為例，參考《台灣十字花科黑腐
病菌偵測及防治》及《遠緣雜交育種障礙及克服策略》等文章整理而成，並感謝鳳試所邱
女士詳加指導。由於筆者對於育種方面較為陌生，若文章有不對之處還請多加指點。
1. 育種目的：Xanthomonas campestris pv. campestris引起的十字花科黑腐病是世
界性的重要病害，抗黑腐病可從許多方面著手，如種子檢定、種子處理、田間衛生及輪作
等。育成抗黑腐病品種亦為方法之一，然已知之甘藍、花椰菜、青花菜、芥藍等十字花科
蔬菜尚未發現具有抗黑腐病基因之原種，需藉由遠緣雜交技術引入小白菜、芥菜抗黑腐病
品種之基因，以育成新的抗病品種。
2. 遠緣雜交之挑戰：雜交育種一般採用無雜交障礙的種內材料為親本，遠緣雜交則將
親本擴大到種間（interspecies）或屬間（intergenus）的層次。遠緣雜交會產生的障礙
，以十字花科為例，十字花科蕓苔屬作物可分為三大類-甘藍類、白菜類及芥菜類，其染
色體數各不相同。甘藍類的甘藍、花椰菜、青花菜、芥藍之染色體為2n=18；白菜類的小
白菜之染色體為2n=20；黑芥類的芥菜之染色體為2n=36。不同類（如，以甘藍類為母本，
小白菜或芥藍為父本）雜交後，由於染色體同源性低，可能發生（1）受精前：親本雜交
不親合，花粉在柱頭無法萌發或伸長受阻；（2）受精後：雜種胚敗育，種子無法形成；
（3）成株後：雜交種植株稔性低或不稔，為此育種過程中需應用許多技術以達成育種目
標。
3. 遠源雜交技術
(1)蕾期授粉：避免自交/雜交不親合，可利用蕾期授粉方式，於柱頭尚未形成花粉萌芽抑
制物質時加以)授粉，其他如生長調節劑、氯化鈉、二氧化碳等處理亦可提高授粉成功率
。蕾期授粉之操作細節依授粉者習慣各有不同，此處以芥菜為例，簡述如下：
A. 選定父本，開花前套袋避免其他花粉沾染。
B. 以酒精消毒鑷子（避免其他花粉沾染），摘取父本花朵，放置於培養皿等容器中。
C. 母本部分，以鑷子除去已開、柱頭已露出或過小的花苞，並除去花序生長點避免新花
苞產生。留下飽滿健康、未打開之花苞，以鑷子除去花瓣。
D. 取父本花朵，將花粉沾上柱頭、套袋保護，1~2日後取下。
(2)胚拯救：授粉成功後多數雜交胚會敗育死亡，故不等種子成熟即採收未成熟胚進行培
養（胚拯救）。胚培養之操作過程於不同實驗室操作細節各有不同，簡述如下：
http://pic.pimg.tw/saahort/1418625132-3134215012.jpg
A. 根據不同品種特性於適當時機採收未成熟胚。
B. 酒精浸潤約10秒後以清水沖洗，再以0.5%次氯酸鈉消毒10分鐘，於無菌環境洗清五次
。
C. 在顯微鏡下切開果莢，挑出未成熟胚，植入培養基。胚齡越小培養的難度越高，較成
熟的胚較易培養，但是也可能已發生敗育，時機需自行記錄掌握。未成熟胚依外觀可分為
飽滿、不飽滿及乾癟三種狀況，越成熟可能越乾癟，根據詢問，不飽滿至乾癟的胚成活率
可能較高，但因品種而異。
D. 以接種環將胚種入培養基，移入遮光環境進行培養，若胚成功萌發則移入弱光環境，
最後移至正常燈照下培養。
E. 植株成長後可利用微體扦插方式進行繼代：取出地上部、切除葉片，將側芽或頂芽重
新種入培養基。
(3)克服不稔性：遠緣雜交株成功長成後仍有稔性低或不稔問題