明明只是個簡單的SDS
為什麼可以出那麼多狀況
為什麼電泳跑不動
為什麼無論我怎麼裝它都會漏水
明明只要一小時的東西我用起來跑了快要12小時
為什麼染完的膠全部碎掉變成一坨
有好多人在等我的實驗結果
大家都要做報告
大家都準備了樣品給我跑膠
我居然跑到膠碎掉了
也已經沒有多餘的樣品重做了
到現在還不敢跟老師說我又搞砸了
不知道該怎麼跟同學交代話花三個星期做的實驗居然在最後ㄧ步驟失敗了
好害怕......
好想哭......

拍拍

幫QQ

幫你組員噓你

做實驗心要細，要承受的起失敗，出問題要找原因，不然不適合走研究這條路

噢噢噢噢 你慘了 GGGGGGG

QQ

完全看不懂

碎掉...你慘了GGGGG

這哪這哪科系的實驗啊

通常1小時需要跑12小時應該是膠濃度太高 可是跑完又碎掉感覺應該是水水的 膠濃度不高 這 怎麼感覺很矛盾? 先找到問題

研究生壓力真的大 拍拍

SOP看清楚，膠的比例有調配好嗎？一開始架膠時，為何沒先檢查好會不會漏再loading,之後染膠會碎，原因也是出在一開始的膠比例，做實驗心要細

裝起來會漏水你還敢跑

這麼簡單的東西大二應該就可以得心應手了吧 QQ

你組員才需要QQ

怎麼可能是研究生?小大一還可以原諒

不是要先測漏嗎@@ 膠台下面(海綿那裡)墊一塊parafilm會比較不會漏~噢好吧沒看到是跑膠時會漏水，我以為是製膠

幫QQ

慘慘慘

膠體電泳我們高中實驗就有了...你組員好慘 而且膠跟樣品都很珍貴的

請人再帶妳做ㄧ次吧～實驗失敗心情真的很差QQ

你沒拿學長姐的SOP嗎？

請好心的學長姐幫忙比較能知道是哪個步驟錯了 邊緣人QQ而且失敗不需要害怕 越怕越會錯 大不了晚點畢業

確定running buffer濃度，電壓設定，sample處理過程有沒沒有問題。

拍拍 哭一哭繼續努力

buffer會漏應該是沒壓緊或你玻璃沒放好，膠有問題的話，marker跑出來應該也不正常

還有你配膠的buffer 有校正pH值？

大二實驗課電泳一次就跑過, 給你拍拍.

快換人跑吧

趕快去重考醬料

看到都覺得幹 不用說你組員了

我能懂你的心情，我也曾經發生過幫別人做實驗結果搞砸的狀況......當下確實很不好受......不過事情都發生了，還是要鼓起勇氣好好面對......

Please call out ...

以為來到生科版

幫你QQ

配下膠為什麼需要鹽酸？做膠沒漏跟跑膠running buffer有沒有漏是兩回事吧…

下膠用的Tris buffer是用Tris-base還是Tris-HCl？弄錯的話經過調pH值後離子濃度會不對，導電度也有差然後通電是固定電流還是固定電壓？一般小膠固定電壓80V的話，起始電流大約在20mA左右，隨著時間電流會下降；反之，若固定電流20mA跑，起始電壓約80V，隨時間電流上升跑到底電壓約150V到200V。超過或低於這些數字太多都要注意，有可能是膠的buffer濃度錯了，或running buffer錯，或是你架電泳時只架一邊另一邊白金線被buffer淹過造成短路等等。就算你膠沒配錯，後面那些錯了，導致跑膠時電流電壓不對造成膠體過熱，可能會使膠脆化，在染的時候就很容易會破掉。話說就是這樣所以我才堅持自己的sample自己跑，至少成敗自己承擔

是用幾%的膠? 染色的搖台我都設60rpm也沒事 可能你盒子液體太少 為什麼下層膠會用到濃鹽酸@@ 是調Tris的pH值時用的話根本不會影響 buffer會漏的話應該是電泳台側邊的軟管不服貼 總之多練習吧@@

而且tris buffer通常都配一個stock在用，很少臨時才配的…甚至後來都直接買配好的

跑這麼多次從來沒失敗過

膠不凝首先懷疑的是10%APS吧...

不過你真的很有耐心可以等12小時

所以現在原PO說得出問題在哪裡了嗎？實驗不是做出來就OK（當然趕DATA的時候是），重點是你要知道為什麼之前失敗，現在OK電源供應器通常只能固定其中一個值，感覺你是固定電壓，但是某種原因短路造成電流過高，所以才會冒煙你用的是哪一家的電泳？Biorad(綠)還是Hoffer(紅)的？

加油 過來人（拍拍

慢慢來吧@@ 拍拍

加油 最近實驗也在瓶頸中...

之前我們實驗室transfer的那台機器老是把我的page膠burn掉...妳的痛苦我完全能理解QQhttp://i.imgur.com/CixxCoc.jpg然後像圖片發生的這種事也發生在我的agarose膠上過QQ

膠不凝固請先重配APS，跑膠會漏直接內外補滿buffer