作者:
chith (74)
2016-12-28 14:27:14明明只是個簡單的SDS
為什麼可以出那麼多狀況
為什麼電泳跑不動
為什麼無論我怎麼裝它都會漏水
明明只要一小時的東西我用起來跑了快要12小時
為什麼染完的膠全部碎掉變成一坨
有好多人在等我的實驗結果
大家都要做報告
大家都準備了樣品給我跑膠
我居然跑到膠碎掉了
也已經沒有多餘的樣品重做了
到現在還不敢跟老師說我又搞砸了
不知道該怎麼跟同學交代話花三個星期做的實驗居然在最後ㄧ步驟失敗了
好害怕......
好想哭......
做實驗心要細,要承受的起失敗,出問題要找原因,不然不適合走研究這條路
作者:
lanx105 (海綿/簡單多細胞)
2016-12-28 14:35:00噢噢噢噢 你慘了 GGGGGGG
作者: Misfits (水土不服樂團) 2016-12-28 14:43:00
完全看不懂
作者: domorita666 (大王) 2016-12-28 14:47:00
碎掉...你慘了GGGGG
作者: Misfits (水土不服樂團) 2016-12-28 14:50:00
這哪這哪科系的實驗啊
作者: shizz (吃不到羅蔔的驢子) 2016-12-28 14:52:00
通常1小時需要跑12小時應該是膠濃度太高 可是跑完又碎掉感覺應該是水水的 膠濃度不高 這 怎麼感覺很矛盾? 先找到問題
作者:
eternia0920 (我ä¸æœƒç”¨æ°´çƒ( ̄□ ̄||)a)
2016-12-28 14:52:00研究生壓力真的大 拍拍
SOP看清楚,膠的比例有調配好嗎?一開始架膠時,為何沒先檢查好會不會漏再loading,之後染膠會碎,原因也是出在一開始的膠比例,做實驗心要細
作者:
asshead (聒聒)
2016-12-28 15:02:00裝起來會漏水你還敢跑
作者:
cargo (Vince)
2016-12-28 15:48:00你組員才需要QQ
作者:
bunnyer (lililala)
2016-12-28 15:48:00怎麼可能是研究生?小大一還可以原諒
不是要先測漏嗎@@ 膠台下面(海綿那裡)墊一塊parafilm會比較不會漏~噢好吧沒看到是跑膠時會漏水,我以為是製膠
作者:
h753951 (HS14)
2016-12-28 15:58:00慘慘慘
膠體電泳我們高中實驗就有了...你組員好慘 而且膠跟樣品都很珍貴的
作者:
kuyar (ku)
2016-12-28 16:05:00請人再帶妳做ㄧ次吧~實驗失敗心情真的很差QQ
作者:
ls4444 (哈利波蔡)
2016-12-28 16:38:00請好心的學長姐幫忙比較能知道是哪個步驟錯了 邊緣人QQ而且失敗不需要害怕 越怕越會錯 大不了晚點畢業
作者:
hsin1106 (過於喧囂的孤獨)
2016-12-28 16:55:00確定running buffer濃度,電壓設定,sample處理過程有沒沒有問題。
作者:
cisale (cisale)
2016-12-28 17:56:00buffer會漏應該是沒壓緊或你玻璃沒放好,膠有問題的話,marker跑出來應該也不正常
作者: huiaa1122a6 2016-12-28 18:02:00
還有你配膠的buffer 有校正pH值?
作者:
wuheroin (我有女友你沒有)
2016-12-28 18:28:00快換人跑吧
作者: kbpoop (poogyfine) 2016-12-28 18:53:00
趕快去重考醬料
作者:
Sylvaine (Poisson-Fisch)
2016-12-28 19:45:00我能懂你的心情,我也曾經發生過幫別人做實驗結果搞砸的狀況......當下確實很不好受......不過事情都發生了,還是要鼓起勇氣好好面對......
作者: BigDick56 (大狄克烏溜) 2016-12-28 20:43:00
幫你QQ
作者:
lail (古道照顏色)
2016-12-28 20:46:00配下膠為什麼需要鹽酸?做膠沒漏跟跑膠running buffer有沒有漏是兩回事吧…
下膠用的Tris buffer是用Tris-base還是Tris-HCl?弄錯的話經過調pH值後離子濃度會不對,導電度也有差然後通電是固定電流還是固定電壓?一般小膠固定電壓80V的話,起始電流大約在20mA左右,隨著時間電流會下降;反之,若固定電流20mA跑,起始電壓約80V,隨時間電流上升跑到底電壓約150V到200V。超過或低於這些數字太多都要注意,有可能是膠的buffer濃度錯了,或running buffer錯,或是你架電泳時只架一邊另一邊白金線被buffer淹過造成短路等等。就算你膠沒配錯,後面那些錯了,導致跑膠時電流電壓不對造成膠體過熱,可能會使膠脆化,在染的時候就很容易會破掉。話說就是這樣所以我才堅持自己的sample自己跑,至少成敗自己承擔
作者: donghey (冬) 2016-12-28 21:11:00
是用幾%的膠? 染色的搖台我都設60rpm也沒事 可能你盒子液體太少 為什麼下層膠會用到濃鹽酸@@ 是調Tris的pH值時用的話根本不會影響 buffer會漏的話應該是電泳台側邊的軟管不服貼 總之多練習吧@@
作者:
lail (古道照顏色)
2016-12-28 21:44:00而且tris buffer通常都配一個stock在用,很少臨時才配的…甚至後來都直接買配好的
所以現在原PO說得出問題在哪裡了嗎?實驗不是做出來就OK(當然趕DATA的時候是),重點是你要知道為什麼之前失敗,現在OK電源供應器通常只能固定其中一個值,感覺你是固定電壓,但是某種原因短路造成電流過高,所以才會冒煙你用的是哪一家的電泳?Biorad(綠)還是Hoffer(紅)的?
作者:
mindu (shrimp)
2016-12-28 22:47:00加油 過來人(拍拍
作者: yuan0703 (煞氣a中二臘腸海狗) 2016-12-28 23:19:00
慢慢來吧@@ 拍拍
作者: LionHeart819 (藍色獅子心) 2016-12-29 02:07:00
加油 最近實驗也在瓶頸中...
作者:
milkpa (風中狂歌的傻子)
2016-12-29 12:20:00膠不凝固請先重配APS,跑膠會漏直接內外補滿buffer