[問題] 請問進行細菌 真菌 及古細菌菌種鑒定 NGS或MOLDI

作者: LUSRICH (ININ)   2018-01-18 01:53:08
請問進行細菌 真菌 及古細菌菌種鑒定時,
該選擇
NGS或MOLDI -TOF呢
送驗之樣本用這兩種方式測到不同的結果
故有此困惑,先感謝版大們之解惑了!!
作者: sunnylaba (laba)   2018-01-18 08:18:00
可以po到Biotech版問看看
作者: rossy (Rossy)   2018-01-18 12:36:00
NGS看基因體序列 MALDI-TOF看蛋白質 一般都先定序然後做Phylogenetic tree去看看這些菌屬於哪一類
作者: ChesterYeah (YA01)   2018-01-18 13:08:00
Maldi-tof 你目的要做什麼?前處理是?沒有target 就沒有特定要看什麼的話,你只會看到一些不知道是什麼的東西這些東西不只會是蛋白質maldi told 要看核苷片段也是可以的,需要比對數據庫看蛋白表現就需要水解,電泳或否,上機,比對資料庫
作者: LUSRICH (ININ)   2018-01-18 21:49:00
感謝版大們回覆我送驗的樣本是含多種未知菌的複合樣本故先送NGS檢測後驗出其中有腸球蔨屬之糞腸球菌,於是委託廠商以腸球蔨屬的培養基分離,並再以malditof蛋白圖譜去鑑種作二次確認,結果打出來的93個點都顯示是另一種菌:耐久腸球蔨,接下來就卡關了 板大們建議以何種方式往下驗證呢?感激不盡
作者: ChesterYeah (YA01)   2018-01-19 08:46:00
93個點 你是指maldi 的plate還是?以及處理方式?
作者: LUSRICH (ININ)   2018-01-19 17:18:00
C大您好 感謝您 我剛剛與廠商確認了這個問題我們當時係以腸球蔨屬培養基上的colony們挑了93個點打哦第94個樣本以Ecoli當對照
作者: ChesterYeah (YA01)   2018-01-19 17:36:00
活菌直接上機嗎?還是有萃取?前提是你選擇培養基上colonies 是純菌株,然後有無萃取步驟或是直接混基然後同一盤上面的點最好也挑去做colony PCR 確認一下有種情況是看似single colony 但卻是重疊若不是,基本上Maldi都只能當作佐證;NGS就看做多深

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